1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。
ADAR1 (N-terminus)雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(N端)
AMPK alpha 2腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體
ADK腺苷酸激酶抗體
A2ML1α2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1
3-Apr細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白3抗體
Actin肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體
ABCB7ATP結(jié)合蛋白家族7抗體
ASCL2ASCL2蛋白抗體
phospho-Ataxin 1(Ser775)磷酸化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體
phospho-ATF1 (Ser63)磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體
phospho-ATF2 (Ser480)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-ATF2 (Thr51 + Thr53)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-ATF2 (Thr69 + Thr51)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-ATF2 (Thr73 + Thr55)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-ATF2 (Thr71 + Thr53)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-ATF2(Thr71)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
ATF5活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體
ATF6 beta活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體
ATICAICAR甲?;D(zhuǎn)移酶抗體
phospho-ATM (Ser794)磷酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體
ATP5EATP5E蛋白抗體
ATP5G2ATP5G2蛋白抗體
ATP6V0D2ATP6V0D2蛋白抗體
ATP6V1B2ATP6V1B2蛋白抗體
ATPIF1ATPIF1蛋白抗體
AttractinAttractin蛋白抗體
Phospho-Aurora B(Tyr12)磷酸化有絲分裂激酶B抗體
ARPM1肌動蛋白相關(guān)蛋白M1抗體
ABH1ALKB蛋白抗體
ACAA1乙酰輔酶A酰基轉(zhuǎn)移酶1抗體
phospho-beta Actin (Tyr53)磷酸化β-肌動蛋白抗體
phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser346)磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR 抗體
phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser355 + Ser356)磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體
APOD載脂蛋白D抗體
ASIC1/BNaC2/ASIC1A酸敏感離子通道1抗體