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淋巴細胞亞群的計數(shù)
更新時間:2015-07-13   點擊次數(shù):1105次


外周血中存在幾種成熟的淋巴細胞亞群。78組成這些亞群的有:具多種不同功能的胸腺淋巴(T)細胞;合成和分泌特異性抗體,來源于淋巴結(jié)的(B)淋巴細胞;null細胞(也叫第三群細胞),它參與抗體介導(dǎo)的細胞毒作用及自然細胞毒作用(自然殺傷細胞)。這些亞群是根據(jù)結(jié)合在細胞膜上的一個或多個糖蛋白而定義的。根據(jù)簇設(shè)計和表達各種抗原的細胞類型,可以在附錄的CD分子表中,找到這些糖蛋白的列表。這些糖蛋白許多都被認為對分子功能很重要。但在T淋巴細胞中,一個單獨的細胞表面糖蛋白的出現(xiàn)并不能說明細胞的功能特征。79.80例如,有些帶CD8標志的T淋巴細胞是細胞毒細胞,其它的卻是抑制/效應(yīng)細胞。帶CD4標志的T淋巴細胞更異質(zhì):有些作為誘導(dǎo)細胞促進效應(yīng)細胞克隆的擴大;有些作為輔助細胞,促進抗體分泌性B淋巴細胞的生長;還有其它的作為抑制/效應(yīng)細胞或遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)的效應(yīng)因子。

細胞膜表面糖蛋白很有用,因為它使識別和計數(shù)具有不同功能的淋巴細胞亞群成為可能。但目前有關(guān)T淋巴細胞表面糖蛋白的描述,通常都定義了實行不止一種功能的亞群。帶有某一特定糖蛋白標志物的細胞數(shù)增加或減少,并不意味那些細胞在體內(nèi)只實行某一特定功能。由于這個原因,淋巴細胞亞群的計數(shù)結(jié)果與疾病診斷或?qū)χ委煹姆磻?yīng)有經(jīng)驗上的。而且,這些經(jīng)驗上的關(guān)聯(lián),在臨床上很有用。

計數(shù)血液中淋巴細胞亞群的方法是以多克隆抗體的提供為基礎(chǔ)的,這些多克隆抗體能識別單獨的細胞表面糖蛋白。典型的操作是:將熒光標記的多克隆抗體與外周血一起孵育,然后在流式細胞儀中計數(shù)反應(yīng)細胞。流式細胞儀是由一個或多個激光源、成像檢測器和細胞束(該細胞束能直接通過激光光路)產(chǎn)生裝置構(gòu)成的細胞分析儀。用直角光散射,調(diào)節(jié)流式細胞儀,可根據(jù)淋巴細胞的大小識別淋巴細胞,合適抗體處理細胞后,用直接熒光計數(shù)帶有特異細胞表面糖蛋白的淋巴細胞。通常用結(jié)合不同熒光的兩種不同抗體同時計數(shù)帶有特異性表面糖蛋白的淋巴細胞,該技術(shù)叫熒光分析法,它用處很大。當(dāng)定義了更多的表面標志物的時候,就有可能鑒別和定量在體內(nèi)僅實行某一單獨功能的淋巴細胞亞群。83而且,體內(nèi)刺激細胞后,通過檢測細胞因子的合成,也能確定特異性的細胞亞群在功能上是否完整。使用能通透細胞的試劑,然后用相應(yīng)的單克隆抗體染色,可檢測好幾種細胞因子(如腫瘤壞死因子,IL-2,γ干擾素)。

淋巴細胞亞群的計數(shù),也叫T或B細胞表面標志物的分析,由此得到不同類型的結(jié)果。每一種淋巴細胞亞群的百分數(shù)和數(shù),都應(yīng)該與健康個體的結(jié)果做對比。另外,在典型的分析中,應(yīng)報告一型與另一型(如輔佐/誘導(dǎo),抑制/細胞毒細胞比率)的比率。

 

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