簡(jiǎn)要描述:
結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測(cè)試盒以束縛態(tài)存在于淀粉體中,催化淀粉鏈的加長(zhǎng)反應(yīng),主要負(fù)責(zé)直鏈淀粉的合成。
更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:1106
商品詳情:
結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測(cè)試盒測(cè)定意義
GBSS(EC 2.4.1.21)以束縛態(tài)存在于淀粉體中,催化淀粉鏈的加長(zhǎng)反應(yīng),主要負(fù)責(zé)直鏈淀粉的合成。
貨號(hào) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 |
YSH3340-1 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3340 | 50管/48樣 | 紫外分光光度法 |
YSH3340 | 25管/24樣 | 紫外分光光度法 |
測(cè)定原理
GBSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應(yīng),將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上,同時(shí)生成ADP;進(jìn)一步通過(guò)反應(yīng)體系中添加的酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH,其中NADPH生成量與前一步反應(yīng)生成的ADP數(shù)量呈正比,通過(guò)340nm下測(cè)定NADPH的增加量,可以計(jì)算GBSS活性。
需自備的的儀器和用品
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提?。?/span>
1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來(lái)水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測(cè)。
2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
3.血清等液體:直接檢測(cè)。
計(jì)算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬(wàn)。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測(cè)定的吸光值過(guò)高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰,因此,570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
普列克底物蛋白同源物樣域家族A成員2ELISA試劑盒 PHLDA2免費(fèi)代測(cè)試劑
普列克底物蛋白2ELISA試劑盒 PLEK2免費(fèi)代測(cè)試劑
普列克底物蛋白ELISA試劑盒 PLEK免費(fèi)代測(cè)試劑
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白9ELISA試劑盒 GLUT9免費(fèi)代測(cè)試劑
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8ELISA試劑盒 GLUT8免費(fèi)代測(cè)試劑
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7ELISA試劑盒 GLUT7免費(fèi)代測(cè)試劑
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6ELISA試劑盒 GLUT6免費(fèi)代測(cè)試劑
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5ELISA試劑盒 GLUT5免費(fèi)代測(cè)試劑
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白14ELISA試劑盒 GLUT14免費(fèi)代測(cè)試劑
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白12ELISA試劑盒 GLUT12免費(fèi)代測(cè)試劑
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白11ELISA試劑盒 GLUT11免費(fèi)代測(cè)試劑
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白10ELISA試劑盒 GLUT10免費(fèi)代測(cè)試劑
葡萄糖磷變位酶5ELISA試劑盒 PGM5免費(fèi)代測(cè)試劑
葡萄糖磷變位酶3ELISA試劑盒 PGM3免費(fèi)代測(cè)試劑
葡萄糖磷變位酶2樣蛋白1ELISA試劑盒 PGM2L1免費(fèi)代測(cè)試劑
結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測(cè)試盒β葡萄糖苷酶(β-GC)/纖維二糖酶測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣
β葡萄糖苷酶(β-GC)/纖維二糖酶測(cè)試盒/微量法100管/48樣
β-葡萄糖醛苷酶(β-GD)測(cè)試盒/比色法50管/48樣
β-葡萄糖醛苷酶(β-GD)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣
β-葡萄糖醛苷酶(β-GD)測(cè)試盒/微量法100管/96樣
γ-氨基丁(GABA)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣
γ-氨基丁(GABA)測(cè)試盒/微量法100管/96樣
γ-谷氨酰半連接酶(GCL)測(cè)試盒/比色法50T/24樣
γ谷氨酰半連接酶(GCL)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣